Phanta Flash Super-Fidelity DNA Polymerase

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Phanta Flash Super-Fidelity DNA Polymerase是一款“兼具”快速扩增和保真度的高保真单酶,延伸速度5 sec/kb,保真度是Taq酶的106倍。应用了新一代热启动技术,配以合适的buffer及特异因子,扩增特异性和成功率显著提高。本款产品对常规模板、粗品模板(细菌、酵母、动植物裂解产物、全血样本等)、高GC/AT模板、 含尿嘧啶模板、含PCR抑制物模板(腐殖酸、乙醇、胆酸盐、血红素等)均可兼容。2 x Phanta Flash Buffer中已经预混了dNTPs与镁离子,相比于一般单酶,简化了加样步骤,操作更加简便省时。

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快速扩增:1 h即可完成10 kb以内片段的扩增(≤10 kb,延伸速度5 sec/kb;>10 kb,延伸速度10 sec/kb)。

保真度高:保真度为Taq酶的106倍。

高成功率:轻松扩出目的条带

适应性广:可兼容粗品模板、高GC/AT模板 (整体GC 24%-79%,局部GC 22%-88%)、甲基化模板、含PCR抑制物模板。

操作简便:“单酶 + buffer”,加样更简单。

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1.快速扩增

使用Phanta Flash Super-Fidelity DNA Polymerase (Vazyme #P521,简称P521)以及市售其他高保真单酶(Supplier A、B-1、B-2、C和D),按照各自说明书推荐的反应体系及反应程序扩增相同模板,结果显示,P521以5 sec/kb的延伸速度,可以成功扩增7,311 bp的cDNA和7,476 bp的基因组DNA,扩增速度和成功率均较优。

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图 1a 扩增10 kb片段所需的扩增时间对比

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图 1b  5 sec/kb的延伸速度可成功扩增7,311 bp的cDNA及7,476 bp的基因组DNA

2.保真度高

采用二代测序方法(P. Mielinis. et al. Journal of Molecular Biology (2021)),测定不同聚合酶的扩增保真度。结果显示,Phanta Flash Super-Fidelity DNA Polymerase保真度是Taq DNA Polymerase的106倍。

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图 2 不同品牌高保真酶保真度比对

3.适应性广

使用Phanta Flash Super-Fidelity DNA Polymerase (Vazyme #P521,简称P521)以及市售其他高保真单酶(Supplier A、B-1、B-2、C和D),扩增粗品模板及高GC/AT模板,P521均可成功扩增。

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图 3a 粗品模板扩增体系

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图 3b 高GC/AT模板扩增体系

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